大鼠面神經核位于延髓腹外側部,呈吻尾稍長,背腹扁的橢圓體。大鼠面神經核吻尾長約1.6mm,平均體積約1.293mm3。大鼠面神經核內的細胞常聚集成幾個亞群,各細胞亞群與外周面神經分支分布的關系已有研究。然而,由于面神經核小,其取材是個難題,今天我們來介紹大鼠面神經核取材的簡易方法。
1. 大鼠麻醉,固定到腦立體定位儀上。
2. 確定Bregma點。
3. 參考《大鼠腦立體定位圖譜》,確定面神經核的位置。
4. 在Bregma-9.80mm的位置左右轉兩孔,然后在Bregma-12.30mm的位置左右轉兩孔。
5. 從立體定位儀上移下大鼠,心臟灌流, 灌注完畢后,剝除顱骨,記下小腦上4個打孔位置,取出整體的大腦、小腦及腦干。
6. 依據小腦上4個孔的位置,用手術刀片平行切兩刀,如上圖,然后用4%的多聚甲醛后固定,冰凍切片,片厚10um。
7. 將切好的標本,光學顯微鏡下觀察,確認是面神經核后,HE染色,拍照。
8. 大鼠面神經核大量取材,取下整體的大腦、小腦及腦干后,依據上述經驗,直接取材即可。